李时珍编纂《本草纲目》时，发现早期的本草书籍中，药名往往混乱，对药材形态与习性记载含煳不清，许多内容只是抄来抄去，缺乏实地考证。他决心亲自验证，带着弟子庞宪和儿子李建元走遍山川林野，蒐集标本、观察生境。他还广访名医与博学之士，甚至向农夫、渔民询问民间验方，并亲身试药以记录功效，将药物形态绘于书中，书中共附有药物图1109幅。

张景岳因善用熟地黄（常用且用量大），人称「张熟地」。熟地黄亦是温补的常用中药之一。张景岳在《景岳全书》中提出，人参、熟地黄、附子和大黄为药中四维，以强调这四味中药的重要性。他在书中写到：「人参、熟地者，治世之良相也；附子、大黄者，乱世之良将也。兵不可久用，故良将用于暂；乱不可忘治，故良相不可缺。」这四味药的作用常被形容为：人参补气第一，熟地黄滋补第一，附子温阳第一，大黄泻下第一。张景岳中晚年的大部分时间都用来诊症和着书，《景岳全书》篇幅近一百万字，全是他一边诊病一边写作，直至二十年后去世。相传张景岳诊务繁忙，日间大部分时间四出诊病，夜间挑灯写作。

吴有性，字又可，后世多称吴又可，着有《瘟疫论》，他认为温疫之邪并非风寒暑湿，而是一种特殊之气「疠气」经由口鼻入侵，潜伏于膜原之间。他据此创制方剂「达原饮」，以槟榔、厚朴、草果、知母等药组成，旨在驱逐伏于膜原的邪气，促使「邪气溃败，速离膜原」。达原饮后来被广泛应用于治疗疟疾、温疫等病证，成为其医学思想的代表。吴又可突破了「外邪必由皮毛而入」的旧说，提出瘟疫有高度传染性，并可能选择性地侵犯特定人群或器官。他的理论带有「一病一药」的思路，与近代医学寻找特效药的方向不谋而合。

杨继洲以《针灸大成》名世。他在家传秘本《针灸玄机秘要》的基础上，广泛参考前代二十余部针灸典籍，并融入个人临床心得编成此书。全书详细记载针灸理论与操作规范，规整腧穴名称与定位，并绘制「铜人明堂图」，使针灸知识更加直观、完整，成为后世学习针灸的权威典籍。

郑和七下西洋，不仅开拓了海上丝绸之路，也促进了文明与技艺的互通。他的船队随行医官与药材，既保障航海途中人员的健康，也将中医药知识与药材交流带到沿途国家。这些医药与文化的传播，与贸易往来相互交织，使南洋诸地在经济往復之余，也逐渐接触并吸收了来自中国的医学理念与治疗方法。