李時珍編纂《本草綱目》時，發現早期的本草書籍中，藥名往往混亂，對藥材形態與習性記載含糊不清，許多內容只是抄來抄去，缺乏實地考證。他決心親自驗證，帶著弟子龐憲和兒子李建元走遍山川林野，蒐集標本、觀察生境。他還廣訪名醫與博學之士，甚至向農夫、漁民詢問民間驗方，並親身試藥以記錄功效，將藥物形態繪於書中，書中共附有藥物圖1109幅。

張景岳因善用熟地黃（常用且用量大），人稱「張熟地」。熟地黃亦是溫補的常用中藥之一。張景岳在《景岳全書》中提出，人參、熟地黃、附子和大黃為藥中四維，以強調這四味中藥的重要性。他在書中寫到：「人參、熟地者，治世之良相也；附子、大黃者，亂世之良將也。兵不可久用，故良將用於暫；亂不可忘治，故良相不可缺。」這四味藥的作用常被形容為：人參補氣第一，熟地黃滋補第一，附子溫陽第一，大黃瀉下第一。張景岳中晚年的大部分時間都用來診症和著書，《景岳全書》篇幅近一百萬字，全是他一邊診病一邊寫作，直至二十年後去世。相傳張景岳診務繁忙，日間大部分時間四出診病，夜間挑燈寫作。

吳有性，字又可，後世多稱吳又可，著有《瘟疫論》，他認為溫疫之邪並非風寒暑濕，而是一種特殊之氣「癘氣」經由口鼻入侵，潛伏於膜原之間。他據此創制方劑「達原飲」，以槟榔、厚朴、草果、知母等藥組成，旨在驅逐伏於膜原的邪氣，促使「邪氣潰敗，速離膜原」。達原飲後來被廣泛應用於治療瘧疾、溫疫等病證，成為其醫學思想的代表。吳又可突破了「外邪必由皮毛而入」的舊說，提出瘟疫有高度傳染性，並可能選擇性地侵犯特定人群或器官。他的理論帶有「一病一藥」的思路，與近代醫學尋找特效藥的方向不謀而合。

楊繼洲以《針灸大成》名世。他在家傳秘本《針灸玄機秘要》的基礎上，廣泛參考前代二十餘部針灸典籍，並融入個人臨床心得編成此書。全書詳細記載針灸理論與操作規範，規整腧穴名稱與定位，並繪製「銅人明堂圖」，使針灸知識更加直觀、完整，成為後世學習針灸的權威典籍。

鄭和七下西洋，不僅開拓了海上絲綢之路，也促進了文明與技藝的互通。他的船隊隨行醫官與藥材，既保障航海途中人員的健康，也將中醫藥知識與藥材交流帶到沿途國家。這些醫藥與文化的傳播，與貿易往來相互交織，使南洋諸地在經濟往復之餘，也逐漸接觸並吸收了來自中國的醫學理念與治療方法。